Le coronavirus du syndrome de diarrhée aiguë porcine (SADS-CoV) est un coronavirus pathogène entérique porcin récemment découvert qui peut provoquer une diarrhée aqueuse chez les porcelets nouveau-nés et entraîner des pertes économiques importantes pour l'industrie porcine.À l'heure actuelle, il n'existe aucune méthode sérologique appropriée pour évaluer l'efficacité de l'infection et du vaccin SADS-CoV, il est donc urgent d'utiliser un test immuno-enzymatique (ELISA) efficace pour compenser cette déficience.Ici, un plasmide recombinant exprimant la protéine de pointe (S) SADS-CoV fusionnée avec le domaine humain IgG Fc a été construit pour produire un baculovirus recombinant et exprimé dans des cellules HEK 293F.La protéine S-Fc est purifiée avec de la résine de protéine G et conserve la réactivité avec les anticorps anti-Fc humain et anti-SADS-CoV.Ensuite, la protéine S-Fc a été utilisée pour développer un ELISA indirect (S-iELISA) et optimiser les conditions de réaction de S-iELISA.En conséquence, en analysant la valeur OD450nm de 40 sérums négatifs au SADS-CoV confirmés par test d'immunofluorescence (IFA) et Western blot, la valeur seuil a été déterminée comme étant de 0,3711.Le coefficient de variation (CV) des 6 sérums positifs au SADS-CoV au sein et entre les cycles de S-iELISA était tous inférieur à 10 %.Le test de réactivité croisée a montré que S-iELISA n'a pas de réactivité croisée avec d'autres sérums de virus porcins.De plus, sur la base de la détection de 111 échantillons de sérum cliniques, le taux de coïncidence global de l'IFA et du S-iELISA était de 97,3 %.Le test de neutralisation du virus avec 7 valeurs OD450nm différentes du sérum a montré que la valeur OD450nm détectée par S-iELISA était positivement corrélée avec le test de neutralisation du virus.Enfin, S-iELISA a été réalisé sur 300 échantillons de sérum d'élevage porcin.Les kits commerciaux d'autres entérovirus porcins ont montré que les taux positifs d'IgG de SADS-CoV, TGEV, PDCoV et PEDV étaient de 81,7 %, 54 % et 65,3 %, respectivement., 6 %, respectivement.Les résultats montrent que le S-iELISA est spécifique, sensible et reproductible, et peut être utilisé pour détecter l'infection par le SADS-CoV dans l'industrie porcine.Cet article est protégé par le droit d'auteur.tous les droits sont réservés.
Heure de publication : 22 juin 2021